gDNA产量——分光光度计不能说明全部结果！

在将DNA用于PCR等酶促分析之前，科学家通常通过260 nm的分光光度法（OD 260值）确定总产量。

短DNA片段表明gDNA产量更高

使用硅胶试剂盒（结合-洗涤-洗脱方法）提取的DNA包含大量共同纯化的小片段DNA 和RNA，如果在纯化过程中没有添加额外的RNA酶，由此产生的OD读数具有误导性，显示的基因组DNA的数量比实际获得的要多。

在所描述的实验中，使用常见的 Silica Kit（供应商 Q）或 EchoLUTION Tissue DNA Micro Kit（每个 4 个样品）从 10 mg 大鼠脑中提取 DNA。光度测定表明，使用 Silica Kit（图）可将 DNA 产量提高 2 倍。然而，如果将相同的样品加载到琼脂糖凝胶上进行分析，很明显硅胶试剂盒的实际 gDNA 含量比 EchoLUTION 试剂盒低几倍。

RNA也有同样的问题

由于RNA的OD 260比 DNA的OD260增加了至少 25% 的测量总量，因此可以很容易地解释通过光度法计算并与凝胶分析相比观察到的DNA浓度的巨大差异。
因此，为了比较从硅胶和BioEcho DNA提取试剂盒中获得的DNA制剂的产量，我们建议始终进行凝胶分析或功能分析，例如 qPCR。

分光光度计法：使用硅胶结合-洗涤-洗脱试剂盒进行误导性gDNA 定量——使用BioEcho单步技术纠正

真的是结合-洗涤-洗脱的最佳产量吗？

由于其非特异性核酸结合方法，Silica试剂盒可纯化任何核酸，包括不需要的DNA小分子和RNA，而EchoLUTION技术仅以高产量提取目标高分子量DNA。如果我们只依靠分光光度法，gDNA产量通常会被高估；下游分析（如 PCR/qPCR或NGS）将受到低灵敏度的影响而导致实验失败。

此外，基于二氧化硅的提取物纯度较低，例如，由可能抑制酶促反应的残留小分子引起 - 如果输入的DNA浓度太低，则更是如此！相比之下，EchoLUTION纯化的DNA始终不含抑制剂、污染RNA和小DNA。只有这些OD读数是可靠的，并且代表了真实的DNA浓度和产量！

EchoLUTION可去除不需要的小DNA和RNA

因此，与使用结合-洗涤-洗脱DNA试剂盒相比，EchoLUTION DNA 提取下游的应用往往更加灵敏和可靠。